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Che cosa sono i vettori Plasmidici?
Vettori plasmidici I plasmidi sono elementi genetici di DNA, circolari ed extracromosomici, che si replicano in maniera autonoma rispetto al cromosoma batterico. In breve il clonaggio mediante vettore plasmidico consiste nel trattare sia il plasmide che il DNA da clonare mediante uno stesso enzima di restrizione.
Si può anche chiedere:, cosa sono i vettori di espressione?
Un vettore di espressione permette a un gene estraneo (transgene) di essere espresso in una cellula ospite. Un gene eucariotico trasformato può non essere espresso in E. coli perché manca delle sequenze necessarie al batterio per l'inizio e la terminazione della trascrizione e per il legame ai ribosomi. Come si ottengono gli organismi transgenici? transgenico Si dice di organismo nel quale sono stati inseriti, per mezzo di tecniche di biologia molecolare, geni provenienti da un altro organismo di specie diversa, o eterologo. Il materiale genetico così modificato è definito DNA ricombinante.
Di conseguenza,, come si costruisce un plasmide ricombinante?
viene effettuato il mescolamento dei frammenti di DNA tagliati con il vettore plasmidico tagliato. la DNA ligasi salda i frammenti di DNA con il vettore plasmidico. come ultimo step, avviene, per trasformazione , l'inserimento delle molecole di DNA ricombinante nelle cellule di E. coli. Come si costruisce un vettore virale? I vettori virali Si ottengono inserendo il gene di interesse nel genoma di diversi tipi di virus, sotto il controllo di un promotore forte. Il virus viene reso difettivo, cioè incapace di riprodursi autonomamente per evitare la diffusione di virus ricombinanti.
Riguardo a questo,, qual è il migliore vettore per geni eucariotici?
I virus vengono frequentemente usati come vettori per i geni eucariotici e procariotici. Dal momento che per un virus infettare le cellule è un fatto naturale, i virus presentano un grande vantaggio rispetto ai plasmidi: non richiedono particolari artifici per essere indotti a penetrare nelle cellule ospiti. Quale tipo di vettore è preferibile utilizzare per clonare un gene umano molto grande? Per clonare piccoli frammenti di DNA (fino a 4000 nucleotidi) si usano in genere dei vettori plasmidici, ma se si vogliono clonare frammenti più lunghi (fino a 40.000 nucleotidi) è preferibile utilizzare altri tipi di vettori, come il batteriofago lambda (virus capace di infettare un batterio) oppure i cosmidi (ibridi
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