In che modo pcr differisce dalla replica del DNA?
Sia PCR che in-vivo replicazione del DNA sono reazioni a catena della polimerasi. Le differenze principali sono:
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Macchinari coinvolti : La replicazione del DNA viene effettuata a temperatura corporea (37 ° C nell'uomo) con l'aiuto di un macchinario complesso. ad esempio, l'elicasi svolge dsDNA, legame a singolo filamento-proteine stabilizzare questi filamenti svolti, ecc. La reazione di PCR utilizza cicli di temperatura (con estremi di 70-90 ° C) per causare denaturazione e ricottura di filamenti di DNA.
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Tipo di polimerasi : Esistono molte DNA polimerasi negli eucarioti. Nella PCR, derivano da DNA polimerasi termostabili batteri or archaea vengono utilizzati (ad es. Taq polimerasi)
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Lunghezza del DNA : Il DNA genomico intero viene regolarmente replicato nel corpo. nella reazione PCR, la polimerasi utilizzata ha un'emivita molto più breve ed è efficace solo per frammenti di DNA molto più piccoli
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Caratteristiche della polimerasi utilizzata : Alta fedeltà, velocità, correzione di bozze e riparazione sono caratteristiche desiderabili richieste per la replicazione del DNA. Le reazioni alla PCR usano polimerasi più semplici che non sono così "ricche di funzionalità". Ad esempio, la Taq polimerasi comunemente usata non ha capacità di correzione di bozze. Tuttavia, sono disponibili in commercio opzioni più accurate (ampliTaqGold, PlatinumTaqPolymerase, Pfu DNA polimerasi, ecc.)