Come diluire una coltura batterica 50 volte, 100 volte e 200 volte?

C'è un limite a quanto è possibile diluire un campione in un solo passaggio.

Probabilmente non vorrai diluire di oltre un fattore 100 in un solo passaggio, perché ciò ti darebbe un grande volume di soluzione diluita.

Piuttosto, useresti la tecnica di diluizione seriale.

Ricorda la formula per il fattore di diluizione (#"DF"#):

#"DF" = V_f/V_i#, Dove

#V_i = "aliquot volume"# e

#V_f = "final volume" = "aliquot volume + diluent volume"#

(A) #"DF" = 50#

Qui possiamo fare una singola diluizione.

Possiamo aggiungere 0.2 ml di campione a 9.8 ml di diluente (le normali cellule saline esploderanno in acqua distillata a causa della pressione osmotica).

#V_f = "0.2 mL + 9.8 mL" = "10.0 mL"#

#"DF" = V_f/V_i = (10.0 cancel("mL"))/(0.2 cancel("mL")) = 50#

(B) #"DF" = 100#

Anche qui possiamo fare una singola diluizione.

Questa volta aggiungiamo 0.1 mL di campione a 9.9 mL di soluzione salina.

#V_f = "0.1 mL + 9.9 mL" = "10.0 mL"#

#"DF" = V_f/V_i = (10.0 cancel("mL"))/(0.1 cancel("mL")) = 100#

(C) #"DF" = 200#

Qui potresti voler fare una diluizione seriale.

La formula per le diluizioni seriali è

#"DF" = "DF"_1 × "DF"_2 × "DF"_3 ×…#

How about a 1:100 dilution followed by a 1:2 dilution?

(1) Add 0.1 mL of sample to 9.9 mL of diluent. #"DF"_1 = 100#. Call this "Solution 1".

(2) Add 5 mL of Solution 1 to 5 mL of saline. Call this "Solution 2".

#V_i = "5 mL"#

#V_f = "5 mL + 5 mL" = "10 mL"#

#"DF"_2 = V_f/V_i = (10 cancel("mL"))/(5 cancel("mL")) = 2#

#"DF" = "DF"_1 × "DF"_2 = 100 × 2 = 200#